摘要:

摘要:作为联合国粮农组织的首个全球重要农业文化遗产(GIAHS)试点保护项目，青田稻—鱼共生系统以其独特的优势受到越来越多的关注。为了更好地保护这一亚洲首个GIAHS项目，实验观察了青田稻—鱼共生系统在不同水稻栽培密度下的土壤肥力情况。结果显示，调查区域稻田土壤的pH值为5.50~6.13，呈弱酸性；土壤养分(全氮、有机质、有效磷和速效钾)含量随水稻生长均呈先减少后增加趋势，且在拔节期—抽穗期达到最低值，但在水稻收割前的成熟期均能恢复至不低于初始的较高水平，表明青田田鱼的活动有助于维持土壤肥力。根据水稻产量与土壤养分的关联度分析结果，发现与水稻产量关系最密切的因子是土壤pH和速效钾；相比于含量丰富的全氮、有效磷和有机质，轻度缺乏的速效钾和较低的pH值限制了水稻的生长和最终产量。研究表明，在本季种养过程中，水稻栽插密度对稻田土壤肥力的影响不显著。

摘要:为了探讨急性氨氮胁迫对黄颡鱼组织中抗氧化酶活性及HSP70和HSP90基因mRNA表达水平的影响，实验随机挑选了360尾黄颡鱼[初体质量(17.25 ±0.05) g]，分别暴露于含有0(对照)、5.70(低浓度组)、28.50(中浓度组)和57.00 (高浓度组) mg/L总氨氮浓度的水体中，进行96 h的急性胁迫实验。实验开始后，分别于0、12、24、48和96 h取样。结果显示，氨氮胁迫发生后，低、中浓度组实验鱼肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)活性呈先升高后降低趋势，而高浓度组则持续降低；低、中、高浓度组实验鱼肝脏中丙二醛(MDA)含量在胁迫开始后显著升高；3 h时，高浓度组实验鱼肝脏中SOD活性达到最低，而MDA含量最高；24 h后，高浓度组实验鱼肝脏中过氧化氢酶(CAT)活性显著升高；低、中、高浓度组实验鱼肝脏中HSP70基因的mRNA表达量呈先降低后升高趋势，而鳃中HSP70基因表达量持续升高，但脑中HSP70基因在0 h后显著降低；氨氮胁迫3 h时，低、中、高浓度组实验鱼肝脏和脑中HSP70基因表达量显著低于对照组，而在鳃中正好相反；相比HSP70基因，高氨氮浓度组实验鱼肝脏和鳃中HSP90基因的mRNA表达量在24 h时达到最高。研究表明，不同浓度的氨氮胁迫会对黄颡鱼抗氧化酶活性造成不同程度的抑制，原因与丙二醛的积累量有关；相比HSP90基因，黄颡鱼HSP70基因的表达量在氨氮胁迫发生后迅速上调，这种生理调控机制提示HSP70在应对急性氨氮胁迫时发挥着更重要的作用。

摘要:物种的遗传结构对推断群体历史动态如有效群体大小、地理分布变迁、基因流、遗传分化等具有重要意义。本实验采用线粒体DNA控制区高变区序列对采自我国海南和台湾的3个短棘鲾群体进行了遗传学比较研究。结果显示，92尾个体共检测到32个单倍型，其中共享单倍型7个；单倍型多样性指数的范围为0.61±0.12~0.86±0.05；核苷酸多样性指数的范围为0.003 3±0.002 4~0.005 3±0.003 4；32个单倍型构建的邻接关系树和最小跨度树均可分为2个单倍型类群，单倍型类群A共有22个单倍型，全部由海南文昌和三亚新村群体构成，单倍型类群B共有10个单倍型，除Hap13外，其余全部由台湾新竹群体构成；台湾新竹群体与海南2个群体之间存在显著差异，但海南文昌群体和三亚新村群体之间无显著差异；中性检验与核苷酸不配对分布分析的结果均显示，短棘鲾2个单倍型类群可能发生了群体扩张事件，扩张时间分别为52 500~105 000和67 600~135 200年前。

摘要:本研究以中华绒螯蟹2龄早熟和晚熟群体选育第四代(G₄)的扣蟹为对象，并以未经选育的养殖群体扣蟹为对照组，采用养殖实验、免疫指标测定和攻毒实验等方法，从生长性能和免疫抗病性能的角度分析并评价不同群体的蟹种质量。结果显示：①养殖实验中两选育群体的最终体质量和特定增长率(SGR)均优于对照组，且2龄早熟群体在8—11月的平均体质量始终低于晚熟群体，但差异不显著；②养殖效果方面，三群体成活率和最终产量由大到小依次为早熟G₄、晚熟G₄和对照组，三群体1龄早熟率的大小次序与之相反，其中雌体产量和1龄早熟率差异显著；③免疫指标方面，两选育组碱性磷酸酶(AKP)和酸性磷酸酶(ACP)活性以及总抗氧化能力(T-AOC)水平均高于对照组，其中雄体肝胰腺中AKP活性以及雌体血淋巴中T-AOC水平差异显著；④两选育群体在攻毒实验中最终死亡率均较低，分别比对照组低29.50%和22.94%。研究表明，选育G₄扣蟹的生长性能和免疫抗病相关生理指标都表现出了比未选育群体优良的特性，市场应用和产业化前景广阔。

摘要:本研究以日照海域同一家系的2龄长牡蛎性腺为研究对象，通过small RNA-seq和RNA-seq技术筛选和鉴定出大量的非编码微小RNA(miRNA)、长链非编码RNA(lncRNA）和环状RNA(circRNA)，并对其进行了生物学特征分析。结果显示，以斑马鱼为参考序列，获得25~30个已知miRNA成熟体和51~63个已知miRNA前体，预测到53~71个新miRNA成熟体和53~77个新miRNA前体；长牡蛎miRNA长度分布为18~26个核苷酸(nt)，其中分布在20~22 nt长度的miRNA数量最多，且miRNA首位碱基多为U。测序分析获得2 302~2 349个注释lncRNA转录本，预测到20 083~24 114个新lncRNA转录本，其中基因间型lncRNA(lincRNA)、内含子lncRNA(intronic lncRNA)、反义lncRNA(anti-sense lncRNA)分别占29.0%、62.1%和8.9%；长牡蛎lncRNA的基因组特征与其他真核生物的lncRNA基因组特征相似，与mRNA相比，外显子(exon)个数少，转录本长度较短，表达水平低。测序分析共获得383个circRNA，其中平均88.54%来源于exon，平均4.51%来源于intronic，平均6.95%来源于intergenic，且鉴定出内源性circRNA潜在大量的miRNA结合位点。研究结果为后续研究长牡蛎调控型ncRNA的表达规律和生物学功能奠定了基础。

摘要:泥蚶生长性状属于数量性状，为了筛选与泥蚶生长性状位点连锁的分子标记，本研究以150颗选育品系F₄泥蚶为对象，利用12个SSR位点进行生长性状关联分析。对生长性状的相关分析表明，各数量性状之间的相关系数均达到极显著水平，其中壳高与活体质量的相关系数最大(0.930)，壳长与活体质量次之(0.927)；但通径分析显示，对活体质量直接影响最大的是壳宽(0.431)，壳长次之(0.332)，决定系数与以上通径分析结果的变化趋势一致。应用SSR位点对选育品系F₄泥蚶进行遗传多样性分析，共检测到61个等位基因，等位基因数(N_a)为3~8个，平均等位基因和有效等位基因(N_e)分别为5.083和3.038；平均观测杂合度(H_o)、期望杂合度(H_e)和多态性信息含量(PIC)分别为0.528、0.646和0.594，表明该群体遗传多样性处于较高水平。SSR位点与生长性状相关性分析，结果获得3个标记与生长性状具有显著相关性，其中标记3012-2与壳长、壳宽、壳顶宽显著相关，标记3564与壳高、放射肋宽显著相关，标记2692与壳长显著相关，据此初步确定为与生长性状相关的候选标记。本研究旨在为泥蚶的遗传改良和选择育种提供基础资料。

摘要:以青蛤成体鳃组织和性成熟的雌、雄青蛤性腺为材料，采用常规制片方法，分别制备青蛤二倍体染色体和单倍体染色体，统计染色体数目。结果显示，青蛤二倍体与单倍体染色体数目分别为2n=38和n=19；核型分析发现，青蛤核型组成为11m+6sm+2st，NF=76，未发现性染色体和随体染色体。本研究以青蛤成熟性腺为制备材料，成功制备单倍体染色体，与青蛤二倍体染色体互相印证，弥补了以往研究的不足，进一步丰富了对青蛤染色体数目及核型组成的认知。同时，也为青蛤染色体水平全基因组测序组装提供更加科学的基础资料。

摘要:实验旨在探究不同核黄素水平对齐口裂腹鱼生长性能、体组成及免疫指标的影响；以540尾健康的齐口裂腹鱼[体质量(10.54±0.01)g]为实验对象，随机分为6组，每组3个重复，每个重复30尾。分别投喂核黄素水平为0.67、2.96、5.83、9.05、11.58和23.42 mg/kg的6种等氮等能的实验饲料，养殖时间56 d。结果显示，齐口裂腹鱼的增重率(WGR)、特定生长率(SGR)以及蛋白质效率(PER)均随核黄素添加水平升高呈先升后降趋势，并均在5.83 mg/kg组达到最大且显著高于其余组；饲料系数(FCR)呈先降后升趋势，5.83 mg/kg组达到最低且显著低于其余组；核黄素可显著影响实验鱼的成活率(SR)、肝体指数(HSI)和脏体指数(VSI)；核黄素可显著影响实验鱼全鱼粗脂肪含量，但对其粗蛋白质、水分和粗灰分含量无明显影响。肝胰脏核黄素沉积量随着饲料核黄素水平的增加而升高；肝胰脏D-α-氨基氧化酶(DAAO)活性在5.83 mg/kg组时达到最高。血清溶菌酶(LYZ)及过氧化氢酶(CAT)活性均随核黄素添加水平的提高而呈先升高后稳定的变化趋势。丙二醛(MDA)含量则随核黄素添加水平的提高而呈先降低后稳定的变化趋势。说明核黄素可有效地提高齐口裂腹鱼随饲料的消化利用率，提高免疫及抗氧化能力，促进其生长。综合考虑，齐口裂腹鱼核黄素添加水平为5.32~5.89 mg/kg。

摘要:本研究采用cDNA末端快速扩增(RACE)等技术获得海带配子体细胞一个γ-亚型碳酸酐酶(CA)基因的cDNA及DNA全长序列。其cDNA长为1 618 bp，编码由305个氨基酸组成的蛋白；DNA长为11 812 bp，具6个内含子，将开放阅读框(ORF)分割成7个外显子；其具有一个gamma-CA的结构域，并具有一个独特的左手平行β-螺旋结构域；由36个CA的氨基酸序列所构建的聚类图显示，该CA与其他物种的γ-CA聚为一支。因而，将该克隆的基因命名为Sjγ-CA。为了解其编码蛋白的功能，将Sjγ-CA的ORF亚克隆至表达载体pET28a上，导入大肠杆菌表达菌株BL21中，培养并诱导目的基因表达，亲和层析以纯化重组蛋白。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE电泳)、免疫印迹和质谱技术鉴定结果表明，纯化所获得的重组蛋白是Sjγ-CA。利用电极法和分光光度计法分别检测重组的Sjγ-CA在CO₂与HCO₃^-中的水合反应及在乙酸对硝基苯酯水解反应中的活性，结果显示，重组Sjγ-CA的水合酶比活力为0.82 U/mg，但没有酯酶活性，从而从功能上鉴定了Sjγ-CA。该研究为后续探讨Sjγ-CA在海带配子体乃至孢子体细胞或组织中的亚细胞定位等研究奠定了基础。

摘要:为了阐明肠道气呼吸对泥鳅的生理作用，本研究通过抑制大鳞副泥鳅肠道气呼吸，探究其主要呼吸器官的组织病理变化。结果显示，被抑制肠道气呼吸的大鳞副泥鳅通常在1周左右死亡。当被抑制肠道气呼吸的大鳞副泥鳅出现垂死时，采集对照组和实验组的鳃、皮肤、前肠、中肠、后肠以及直肠进行苏木素—伊红(H.E)染色、阿利新蓝—高碘酸雪夫氏(AB-PAS)染色组织切片观察和扫描电镜观察，主要的病理变化：①H.E染色结果显示实验组大鳞副泥鳅鳃丝末端充血，背部皮肤表皮层的毛细血管收缩并减少，且真皮层细胞呈畸形，前肠黏膜褶膨大，后肠浆膜层有血红细胞渗出，后肠、直肠结缔组织显著增厚；②AB-PAS染色结果显示，实验组大鳞副泥鳅鳃、背部皮肤、后肠、直肠组织中嗜酸性空泡细胞均增多，前肠和中肠固有层酸性黏蛋白含量增多，黏膜下层中性黏蛋白含量减少；③扫描电镜结果显示，实验组大鳞副泥鳅鳃丝鳃小片表面皱缩，表皮受损脱落，背部皮肤表面分泌孔增加，中肠内腔表面突起增多，后肠和直肠絮状颗粒增多。研究表明，抑制大鳞副泥鳅肠道气呼吸会引发其主要呼吸器官上皮组织出现黏液细胞增多、血红细胞溢出等病理变化，甚至导致机体死亡，由此可知，肠道气呼吸行为是大鳞副泥鳅的必要生理活动。本研究将为大鳞副泥鳅的健康养殖及幼苗培育提供新的参考。

摘要:为了探究饥饿胁迫对日本医蛭唾液腺基因表达水平的影响，本实验通过Illumina Hiseq 2500高通量测序平台分别对饥饿30 d处理组(D30)和饥饿0 d (D0)对照组的日本医蛭的唾液腺组织进行双端测序，对获得的原始数据进行质量控制及从头组装，获得145 981个unigenes，平均长度为675 bp，N50为1 127 bp。针对CDD、KOG、COG、NR、NT、PFAM、Swissprot、TrEMBL、GO和KEGG等数据库的序列比对分析，145 981个unigenes均能得到注释。通过引入TPM（transcripts per million）来估算基因表达水平，并通过DEGseq进行基因表达差异分析。以饥饿0 d为对照组，显著差异基因筛选条件设置为Q value<0.05且差异倍数|Fold Change| > 2，获得2 650个差异基因，其中667个基因显著上调，1 983个基因显著下调。选取日本医蛭唾液腺4个重要功能基因进行荧光定量PCR（qRT-PCR）验证，结果证明转录组测序分析可靠。将所有差异表达基因进行GO功能富集分析，显著富集到175条途径，其中胞质核糖体途径富集程度最为显著，核糖体途径次之，且参与这些途径的差异基因基本均下调。KEGG通路富集分析进一步证明，差异基因在核糖体通路中富集程度最为显著。此外，差异基因中4个基因被预测参与抗凝、抗血栓、抗菌、抗炎和抗肿瘤过程，这可能在各种疾病的治疗中发挥重要作用。参与核糖体通路的基因表达量显著降低，表明日本医蛭唾液腺通过降低蛋白质代谢以应对饥饿环境。该实验结果为深入研究日本医蛭唾液腺饥饿胁迫适应的分泌调控机制以及药用价值基因的发掘提供了重要的参考材料，并为其他医学蛭类研究提供参考依据。

摘要:中华绒螯蟹的“水瘪子”病是一种以肝胰腺发白萎缩为主的多症状疾病，本研究旨在评估“水瘪子”病的主要体征指标，为科研人员和临床工作者进一步规范诊断标准提供参考。通过采集江苏兴化和盐城健康或疑似“水瘪子”病的中华绒螯蟹样本，测量评定了11个体征指标并进行了系统聚类、主成分回归以及多重对应分析。通过分析共获得“水瘪子”病的5个体征指标，并评估了“水瘪子”病的5个症状变化，分别为活力差，遇应激时无逃跑、爬动等运动现象；较低壳硬度，剥离头胸甲时头胸甲部分区域破碎；步足肌肉萎缩，可能出现积水；肝胰腺呈淡黄、白或灰白色；肝胰腺指数低(2%~9%)。同时，分析结果显示，体质量降低、鳃和肝胰腺颜色加深等一些症状表现与“水瘪子”病的常规症状无明显相关。研究表明，活力、壳硬度、肌肉饱满度、肝胰腺颜色和肝胰腺指数等指标可能成为“水瘪子”病评估中的主要体征指标。

摘要:耳石是头足类重要的硬组织，被广泛用于研究头足类的年龄与生长、种群结构和生活史等。根据我国灯光罩网渔船2016年1—3月和2017年1—3月在中国南海西沙群岛海域调查生产期间采集的鸢乌贼样本，测量了513枚鸢乌贼耳石外部形态参数（雌性276枚、雄性237枚），结合耳石的日轮数据，对西沙群岛海域鸢乌贼耳石的微结构及其生长特性进行了研究。主成分分析显示，耳石总长（TSL）、最大宽度（MW）、侧区长（LDL）和翼区长（WL）可以作为鸢乌贼耳石外形生长的特征参数。协方差分析表明，耳石的特征参数与日龄、与胴长的生长均不存在性别间显著性差异，TSL、MW和LDL与日龄的关系均最适合用幂函数表示，与胴长的关系则均最适合用对数函数表示。TSL、MW和LDL的绝对和瞬时相对生长率均随着日龄的增加而呈现先增加、后减少的趋势，且在181～210 d分别达到峰值，因此，181～210 d可能是鸢乌贼耳石外形生长的拐点。

摘要:自二十世纪90年代，白斑综合征病毒(WSSV)就因其暴发范围广、致死率高得到了广泛的关注。研究主要集中在确定该病毒蛋白的结构及功能，以及利用其囊膜蛋白制备亚单位疫苗、研发DNA疫苗等来提高对虾抵抗白斑综合征病毒的能力，尽管免疫防治目前在实验室阶段已取得了显著的保护效果，但因其给药方式局限以及成本较高等因素一直没有应用于实际生产中。VP19和VP28是白斑综合征病毒主要的囊膜蛋白，在WSSV感染对虾的过程中起着非常重要的作用。本文从WSSV的基因组学、VP19和VP28的蛋白质结构及其在免疫防治中的应用等方面概述了VP19和VP28的研究进展，包括蛋白亚单位疫苗、DNA疫苗、RNA疫苗以及相关抗体的研究。在总结了不同类型疫苗的保护效果后发现，VP19和VP28的双价疫苗的保护率较高，为今后制定有效的WSSV控制方法提供了参考。

摘要:角质颚是头足类重要的摄食器官，其表面具有特殊的色素沉积。为了探明角质颚色素的沉积机理，本研究分析了角质颚色素沉积程度不同的3种头足类(剑尖枪乌贼、茎柔鱼、曼氏无针乌贼)，以及茎柔鱼角质颚色素沉积程度不同部位(喙部、侧壁、翼部)的主要化学成分和碳氮稳定同位素比。结果显示，茎柔鱼角质颚不同部位的蛋白质与儿茶酚含量为喙部 > 侧壁 > 翼部，而C/N比值为翼部 > 侧壁 > 喙部；3种头足类角质颚中蛋白质与儿茶酚含量为曼氏无针乌贼 > 茎柔鱼 > 剑尖枪乌贼，而C/N比值为剑尖枪乌贼 > 茎柔鱼 > 曼氏无针乌贼。茎柔鱼角质颚各部位壳聚糖含量与C/N值呈显著正相关，各部位蛋白质含量与C/N值呈显著负相关；3种头足类角质颚C/N随壳聚糖含量增大而增大，C/N随蛋白质含量增大而减小。角质颚C/N增大，则几丁质含量高，蛋白质含量低，对应色素沉积变浅；C/N减小，则几丁质含量低，蛋白质含量高，对应色素沉积变深。研究表明，蛋白质与几丁质含量的高低决定角质颚色素沉积的深浅，这一结论为研究头足类种间食性差异以及个体发育期食性转变提供了基础。

摘要:为研究几种经济红藻中茉莉酸合成途径的关键物质，实验采用液相色谱—质谱联用技术(LC-MS)对茉莉酸生物合成途径相关物质建立检测方法，并对龙须菜、坛紫菜受到机械损伤时各物质的变化情况进行检测。以100%甲醇提取茉莉酸(JA)、茉莉酸甲酯(MeJA)、12-氧-植物二烯酸(12-OPDA)和13-氢过氧化亚麻酸(13-HpOTE)，利用XBridge^TM C₁₈色谱柱，以甲醇/水为流动相分离4种物质。优化条件下4种物质得到良好分离，加标回收率为81.23%~90.25%，检测限为0.04~0.56 ng/mL，灵敏度高。坛紫菜、龙须菜和真江蓠3种红藻中，坛紫菜中未检测到JA和13-HpOTE，4种物质均在另外2种藻中检测到。龙须菜受机械损伤胁迫后，4种物质在短时间内得到积累，其中13-HpOTE响应迅速。研究表明，红藻中可能存在类似于植物的茉莉酸合成途径，并参与对损伤的胁迫响应。

摘要:为更好地分析东海海域漂流铜藻是源于舟山海域底栖铜藻的可能性，并为此提供实地生态学参考依据，本研究以枸杞岛海域底栖铜藻为对象，研究底栖铜藻植株和气囊的形态特征变化及其对海洋环境因子变化的响应，探讨底栖铜藻气囊发育成熟的窗口期。结果显示，9月铜藻植株顶部的主侧枝开始出现气囊，翌年3—5月铜藻藻体生长速率最大，3—4月主侧枝的气囊数量快速增长，4月每根主侧枝平均气囊数量达最大，气囊发育成熟。各月气囊的数量、平均长度和平均湿重的分布为顶部主侧枝 > 中部主侧枝 > 底部主侧枝，平均直径较均匀，底部主侧枝气囊平均体积显著小于顶部和中部的。铜藻完成生活史所需的净效积温为4 434.75 ℃·d，9月气囊开始出现时所需的净效积温为1 853.47 ℃·d，4月气囊生长发育达到峰值所需的净效积温为3 611.25 ℃·d。研究海域的海温变化主要受季风活动引起的海流变化影响，海水低温期后的升温条件可能是诱发铜藻快速生长的因素，较高的海温可限制铜藻的生长。